保存方法
-20℃保存。
产品介绍
本产品是 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(SDS-PAGELoadingBuffer,5X),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。可以用于常规的SDS-PAGE 蛋白样品的上样。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可指示电泳进程。
操作步骤
1.在室温或不超过 37℃的水浴中溶解 SDS-PAGE 上样缓冲液(5X)。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每4微升蛋白样品加入1微升蛋白上样缓冲液(5X)的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(5X)。
3.100℃或沸水浴加热 3-5分钟,以充分变性蛋白。注意:如果起始时细胞或组织的用量较大,基因组 DNA 含量较高,煮沸 3-5 分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸5-10 分钟或者加入适量稀释成 1X的蛋白上样缓冲液后再煮沸 3-5分钟。充分煮沸后一方面可以使结合在基因组 DNA上的蛋白充分释放,同时会导致基因组DNA的部分断裂从而使粘稠感消失,这样就不会影响后续的上样操作了。
4.冷却到室温后,直接上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内即可。5.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳
注意事项
1.如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿